ディーン（ジェンセン・アクレス）とサム（ジャレッド・パダレッキ）はついに父親のジョン（ジェフリー・ディーン・モーガン）を見つけたが、ジョンはディーンを救うために地獄の奥深くまで行くことをいとわず、兄弟二人を残して「ハンター」としての任務を続ける。 。時を同じくして兄弟達も『黄色い目の悪魔』の存在を知り、この最大の敵を追跡し始める。二人は超常現象を次々と解決していったが、二人の兄弟は常に性格や理想の違いがあり、時折騒がしかった。しかし、結局のところ、黄色い目の悪魔のターゲットはサムだけでした。サムが幸せに生きるために、ディーンはためらいなく悪魔と取引し、サムの命と引き換えに自分の魂を交換しました。